组织切片 求精教学(图)

下列的各种切片方法基本上属于制作永久玻片的各种切片方法。切片前会因应材料特性要作某些处理，切片后，便进入染色及制片的阶段。

徒手切片:意即仅用双手及刀片来切片的方法。若材料过小，可置于干燥的通草髓中，再徒手切片。

木材切片：木材由于质坚硬，不易进行切片，需要先裁取适当的大小(通常为0.5×0.5×4 厘米，适于切片机的大小)以煮沸法去除材料中的气体，再将材料软化(软化剂如甘油、三甘醇)，软化后的材料再以切片机进行切片。

埋蜡切片：将材料埋于蜡块中，再连同蜡块一同切片，切片完再将材料里的石蜡去除的方法。

脱水：即脱去组织内的水分，借着某些溶媒置换组织内水分的过程。一般经过固定的组织内常含有较多的水分，而水是不能与蜡相混合的，因此，在浸蜡之前必须脱去组织块中的水分。乙醇是最常用的脱水剂，可与水随意混合，脱水能力强，并可硬化组织。其穿透组织的速度很快，常导致组织块收缩、变脆。因而，在使用乙醇脱水的时候，应先从低浓度开始，然后再依次递增乙醇的浓度，使用不同浓度的乙醇逐步将组织块内的水分置换出来。

①新鲜恒冷箱冷冻切片，厚6~8μm，平贴在盖玻片上。

②滴染法：将有冷冻切片的盖玻片（标本面朝上）平放于预热好的培养皿中（底部垫一湿滤纸），滴加孵育液至全部覆盖组织，于37℃温箱中孵育45~60分钟（肝，心肌组织15分钟即可）。

③于生理盐水中冲洗二次（轻晃，以防脱片）。

④10%福尔马林生理盐水固定10分钟。

⑤15%酒精浸洗5分钟（换二次）。

⑥甘油明胶封片。

结果：酶活性强处呈蓝色颗粒（双甲沉淀），酶活性较低时形成紫红色单甲。在光镜下，该酶活性于肝小叶内分布呈明显分带现象，周边带强于中央带。在心肌细胞纵切面，酶活性颗粒沿心肌细胞长轴整齐排列，相邻心肌细胞的空白处为闰盘。