进口PCR仪的常见问题详细解答

进口PCR仪的常见问题详细解答

进口PCR仪常见问题及回答

1. 进口PCR仪cDNA产量的很低

可能的原因：

*RNA模板质量低

*对mRNA浓度估计过高

*反应体系中存在反转录酶抑制剂或反转录酶量不足

*同位素磷32过期

*反应体积过大，不应超过50μl

2. 进口PCR仪扩增产物在电泳分析时没有条带或条带很浅

****常见的原因在于您的反应体系是进口PCR仪的反应体系而不是RT-进口PCR仪的反应体系

*与反应起始时RNA的总量及纯度有关

*建议在试验中加入对照RNA

*链的反应产物在进行进口PCR仪扩增时，在总的反应体系中的含量不要超过1/10

*建议用Oligo(dT)或随机引物代替基因特异性引物（GSP）用于链合成。由于RNA模板存在二级结 构，如环状结果，有可能导致GSP无法与模板退火；或SSⅡ反转录酶无法从此引物进行有效延伸。

*目的mRNA中含有强的转录中止位点，可以试用以下方法解决：

a. 将链的反应温度提高至50℃。

b. 使用随机六聚体代替Oligo(dT)进行链反应。

进口PCR仪其他问题可以访问：http://www.baigeyq.com/newsshow_116.html

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