色谱理论塔板数（有效率）和分离度的测定

理论塔板数（N），色谱的柱效参数之一，（简称柱效）。N取决于固定相的种类、性质（粒度、粒径分布等）、填充状况、柱长、流动相的种类和流速及测定柱效所用物质的性质。分离度又称分辨率，为了判断分离物质对色谱柱在色谱柱中的分离情况。常用分离度作为柱的总分离效能指标，用R表示。R等于相邻色谱峰保留时间之差与两色谱峰峰宽均值之比。以分析由硬脂酸甲酯和油酸甲酯按当量比例组成的混合物（例如，由可可脂制得的甲酯）为例。合理选择进样量、柱温和载气流量，使硬脂酸甲酯峰的值在溶剂峰出现后15min内出现且达到满标的3/4。见图1

图1 理论塔板数（有效率）和分离度的测定理论塔板数有效率由下式计算分离度的计算式中：n——理论塔板数；R——分离度；S——保留距离，mm，从色谱图起点到硬脂酸甲酯峰间的距离；w1——硬脂酸甲酯的峰宽，mm，是从曲线两个拐点作切线与基线的交点间的距离；w2——油酸甲酯的峰宽，mm，是从曲线两个拐点作切线与基线的交点间的距离；Y——硬脂酸甲酯与油酸甲酯峰间的距离，mm。