L6大鼠成肌细胞

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英文名称：

L6 rat skeletal myoblasts

编号BH-C3005

培养操作步骤 ：

1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；

2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；

3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；

4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；

5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。

实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；

2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造，并经过铬酸洗液处理；

3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；

4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；

5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

细胞培养的优点：

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

EPHA4重组人 EphA4 / HEK8 蛋白 (aa 570-986, His & GST 标签) Protein

AGER重组人 AGER / RAGE 蛋白 (His 标签) Protein

IDO1重组人 IDO1 / IDO 蛋白 Protein

ENTPD2重组人 NTPDase 2 / ENTPD2 蛋白 (aa 29-460, His 标签) Protein

PROK1重组人 EG-VEGF / prokineticin-1 蛋白 (His 标签) Protein

FAM19A2重组人 FAM19A2 蛋白 (Fc 标签) Protein

SAA4重组人 SAA4 蛋白 (GST 标签) Protein

SULT1A3重组人 SULT1A3 蛋白 (His 标签) Protein

TFAP2C重组人 TFAP2C / AP2-GAMMA 蛋白 (His 标签) Protein

WWP2重组人 WWP2 蛋白 (His & GST 标签) Protein

MSLN重组人 MSLN / Mesothelin 蛋白 (Fc 标签) Protein

SIAE重组人 sialate O-acetylesterase / SIAE 蛋白 (His 标签) Protein

ANTXR1重组人 ANTXR1 蛋白 (Fc 标签) Protein

ADAMTSL1重组人 ADAMTSL1 / PUNCTIN 蛋白 (His 标签) Protein

CABP5重组人 CABP3 / CABP5 蛋白 (His 标签) Protein

APOL1重组人 APOL1 / apolipoprotein L1 蛋白 (His 标签) Protein

DYDC2重组人 DYDC2 / DPY30 domain containing 2 蛋白 (GST 标签) Protein

IL20重组人 IL20 / Interleukin-20 蛋白 Protein

CD247重组人 CD247 / CD3-ZETA 蛋白 (GST 标签) Protein

PIANP重组人 C12orf53 蛋白 (Fc 标签) Protein

FKBP7重组人 PPIase / FKBP7 蛋白 (Fc 标签) Protein

PPP3CA重组人 PPP3CA / 蛋白 phosphatase 2B 蛋白 (His 标签) Protein

PPP3R1重组人 PPP3R1 蛋白 (His 标签) Protein

MMP19重组人 RASI-1 / MMP19 蛋白 Protein

BPIFA2重组人 BPIFA2 / C20orf70 蛋白 (Fc 标签) Protein

PDGFRA重组人 PDGFRa / CD140a 蛋白 (His & GST 标签) Protein

CXCL10重组人 CXCL10 / Crg-2 蛋白 Protein

CLEC10A重组人 CLEC10A / MGL1 / CD301 蛋白 (Fc 标签) Protein

CD68重组人 CD68 / Macrosialin / Gp110 蛋白 (aa 1-319, His 标签) Protein

PDE3A重组人 PDE3A 蛋白 (His & GST 标签) Protein

USP46重组人 / 小鼠 USP46 蛋白 (SUMO 标签) Protein

CANT1重组人 CANT1 蛋白 (Fc 标签) Protein

SCN3B重组人 SCN3B 蛋白 (His 标签) Protein

PDE1C重组人 PDE1C 蛋白 (His & GST 标签) ProteinL6大鼠成肌细胞MAP1B 微管相关蛋白1B抗体MSH3 错配修复蛋白3抗体MDGA2 神经元膜糖蛋白锚定蛋白2抗体MYRIP MYRIP蛋白抗体Myelin PLP 髓磷酯髓鞘蛋白1抗体MCSF 巨噬细胞克隆刺激因子抗体4-Mar 膜相关环指蛋白4抗体MLCK 肌球蛋白轻链激酶抗体MPS1细胞培养操作规程：一．培养基及培养冻存条件准备：1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号优质胎牛血清，10%。2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。

温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。二．细胞处理：1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM，常温条件下离心5分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，吹打均匀后，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。