NR8383大鼠肺泡巨噬细胞

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英文名称：

Alveolar macrophages of NR8383 rats

编号BH-C3006

培养操作步骤 ：

1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；

2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；

3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；

4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；

5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。

实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；

2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造，并经过铬酸洗液处理；

3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；

4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；

5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

细胞培养的优点：

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

Methamphetamine 甲基苯丙胺抗体

MIC1 结肠癌相关蛋白MIC1抗体

MHC Class II 组织相容性复合体β抗体

l-Myc Myc基因肺癌相关蛋白抗体

Megalin 糖蛋白gp330抗体

phospho-MyoD1(Ser200) 磷酸化肌原调节蛋白抗体

MAP4K1 造血祖细胞激酶1抗体

MAP4K4 丝裂原活化蛋白激酶MAP4K4抗体

phospho-MAP3K7IP1(Ser423) 磷酸化转化生长因子β活化激酶结合蛋白1抗体

phospho-MAP3K7IP1(Thr431) 磷酸化转化生长因子β活化激酶结合蛋白1抗体

phospho-MAPK3(Tyr204) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶3抗体

phospho-MEK2(Ser226) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶2抗体

phospho-MEF2D(Ser180) 磷酸化肌细胞特异性增强因子2D抗体

phospho-MEF2D(Ser444) 磷酸化肌细胞特异性增强因子2D抗体

Phospho-MAPKAPK2(Ser272) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2抗体

phospho-MAPKAPK5(Thr182) 磷酸化p38调节/激活蛋白激酶抗体

phospho-MAPKAPK5(Ser93) 磷酸化p38调节/激活蛋白激酶抗体

phospho-MAP4K1(Ser171) 磷酸化造血祖细胞激酶抗体

PRAK p38调节/激活蛋白激酶抗体

MEF2D 肌细胞特异性增强因子2D抗体

phospho-MAP4K4(Ser801) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶MAP4K4抗体

Phospho-MARCKS(Ser170) 磷酸化丙氨酸蛋白激酶C底物Marcks抗体

MTGR1 髓易位基因相关蛋白1抗体

BBS6 巴德-毕德氏综合征蛋白BBS6抗体

MKLP2 有丝分裂驱动蛋白样2抗体

MFAP1 微原纤维胶原相关蛋白1抗体

MND1 减数分裂核分裂蛋白1抗体

MDFIC 肌原调节抑制蛋白抗体

MDM2BP 双微体2癌基因结合蛋白抗体

MMP20 基质金属蛋白酶20

MRP8 多药耐药相关蛋白8抗体

MRP7 多药耐药相关蛋白7抗体

phospho-MLF1 Interacting Protein(Thr78) 磷酸化卡波西氏肉瘤疱疹病毒潜伏核抗原相互作用蛋白1抗体

MATK 酪氨酸蛋白激酶细胞分裂素抗体

MLF1 Interacting Protein 卡波西氏肉瘤疱疹病毒潜伏核抗原相互作用蛋白1抗体

MAGEF1 黑色素瘤抗原F蛋白家族1抗体

MGAT5 糖蛋白GNTVA抗体

MIIP IGFBP2结合蛋白/迁移和侵润抑制蛋白抗体AMPK重组人 AMPK (G1/B1/A2) Heterotrimer 蛋白 Protein IL36G重组人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169) Protein FCGR2A重组人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His 标签) Protein ANGPTL4重组人 ANGPTL4 蛋白 (Fc 标签) Protein IL36A重组人 IL1F6 / IL36 蛋白 (aa 6-158) Protein ENPP5重组人 ENPP5 蛋白 (His 标签) Protein NLK重组人 nemo-like kinase / NLK 蛋白 (His & GST 标签) Protein STK40重组人 STK40 蛋白 (His & GST 标签) Protein NRG1重组人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD, Fc 标签) Protein AGER重组人 AGER / RAGE 蛋白 Protein C1D重组人 C1D 蛋白 (GST 标签) Protein SIGLEC5重组人 SIGLEC5 蛋白 (Fc 标签) Protein CD1B重组人 CD1B / CD1A 蛋白 (Fc 标签) Protein IL17A重组人 IL17 / IL17A 蛋白 (His 标签) Protein IL17A重组人 IL17 / IL17A 蛋白 Protein IFI30重组人 IFI30 蛋白 (His 标签) Protein MAX重组人 MAX / MYC associated factor X 蛋白 (His & GST 标签) Protein IZUMO4重组人 IZUMO4 / C19orf36 蛋白 (Fc 标签) Protein ERP27重组人 ERP27 蛋白 (Fc 标签) Protein PSG6重组人 PSG6 / PSG10 蛋白 (His 标签) Protein C7重组人 C7 / Complement component 7 蛋白 (His 标签) Protein NT5C3A重组人 NT5C3 蛋白 Protein KLRC1重组人 NKG2A / CD159A / KLRC1 蛋白 (His 标签) Protein IgG3重组人 IgG3-Fc / IGHG3 蛋白 Protein TLR4重组人 TLR4 / CD284 蛋白 (His 标签) Protein FCGR2B重组人 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His 标签) Protein SHH重组人 SHH / Sonic hedgehog 蛋白 (aa 1-197, His 标签) Protein FCGR3B重组人 CD16b / FCGR3B 蛋白 (His 标签) Protein FGF19重组人 FGF19 蛋白 Protein BPI重组人 BPI 蛋白 (His 标签) Protein ASGR2重组人 ASGR2 蛋白 (His 标签) Protein CDK2AP2重组人 CDK2AP2 蛋白 (His 标签) Protein DDR2重组人 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白 (aa 422-855, His & GST 标签) Protein IL2RG重组人 IL2RG / CD132 蛋白 (Fc 标签) Protein MET重组人 c-MET / HGFR 蛋白 (aa 956-1390, His & GST 标签) Protein DDR1重组人 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 (aa 444-913, His & GST 标签) Protein

NR8383大鼠肺泡巨噬细胞细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号优质胎牛血清，10%。2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。

温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。二．细胞处理：1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM，常温条件下离心5分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，吹打均匀后，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。