208F大鼠成纤维细胞

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英文名称：

208F rat fibroblasts

编号BH-C3020

培养操作步骤 ：1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。

实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法； 2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造，并经过铬酸洗液处理； 3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻； 4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

细胞培养的优点：1.研究的对象是活细胞在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。2.研究条件可以人为控制pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。3.研究的样本可以达到比较均一性通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。4.研究内容便于观察、检测和记录采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

IL36B重组人 IL36B / IL1F8 蛋白 (His 标签) Protein

IL36A重组人 IL1F6 / IL36A 蛋白 (His 标签) Protein

FGFR2重组人 FGFR2 / CD332 蛋白 (aa 400-821, His & GST 标签) Protein

MS4A1重组人 CD20 / MS4A1 蛋白 (aa 213-297, His 标签) Protein

CXCL12重组人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a) Protein

CASP7重组人 CASP7 / caspase 7 / MCH3 蛋白 (His 标签) Protein

SHH重组人 SHH / Sonic hedgehog 蛋白 (aa 198-462, His 标签) Protein

HFE2重组人 Hemojuvelin / HFE2 蛋白 (His 标签) Protein

DEFB103A重组人 Defensin / Beta-defensin 3 / DEFB103 蛋白 (His 标签) Protein

MFGE8重组人 MFG-E8 / lactadherin / MFGE8 蛋白 (His 标签) Protein

GPR114重组人 GPR114 蛋白 (Fc 标签) Protein

Morphine (C1F3) 吗啡单克隆抗体

Morphine(2F11) 吗啡单克隆抗体

MAS1 GTP结合蛋白MAS1抗体

MAG 髓鞘相关糖蛋白-a抗体

MAGE-1 黑色素瘤相关抗原抗体

Mkl1 myocardin相关转录因子抗体

MTF-1 金属应答元件结合转录因子-1抗体

MAP3K8 丝裂原活化蛋白激酶激酶8抗体

Phospho-MAP3K8 (Ser400) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶8抗体

Phospho-MAP3K8 (Thr290) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶8抗体

MFSD2A 促进调解蛋白家族2A抗体

MIA2 黑色素瘤抑制活性蛋白2抗体

MTSS1 肿瘤转移抑制蛋白1

MLCK 肌球蛋白轻链激酶抗体

MYCBPAP MYCBPAP抗体

MHC class I 组织相容性复合体蛋白1抗体

MRPS22 线粒体核糖体蛋白S22抗体

MPP7 棕榈酰化膜蛋白7抗体

Marijuana(2B1) 小鼠抗大麻单克隆抗体

MYL1+3 肌球蛋白轻链1/3抗体

phospho-MLC(Ser20) 磷酸化肌球蛋白轻链抗体

MuRF1/Trim63 肌肉细胞特异性泛素蛋白连接酶1抗体

MAFbx/Fbx32 泛素蛋白连接酶抗体

MCT2 单羧酸转运蛋白2抗体

MDH1 可溶性苹果酸脱氢酶抗体

PKC delta 蛋白激酶C亚性D型抗体

Phospho-mu Opioid Receptor (Ser375) 磷酸化µ-型阿片受体抗体

Phospho-MEK1 + MEK2 (Ser222) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶1/2抗体

MMP9 基质金属蛋白酶9抗体

MIS12 染色体及有丝分裂蛋白MIS12抗体

MCT1 单羧酸转运蛋白-1抗体

Mitochondrial ribosomal protein L11 线粒体核糖体蛋白L11抗体

Myocardin 促血管平滑肌细胞分化因子抗体

MS4A2 跨膜结构域4亚家族成员2抗体

phospho-C-Myc(Thr373) 磷酸化致癌基因C-Myc抗体

Myotilin 肌收缩蛋白MYOT抗体

phospho-MAP4K4(Ser631) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶MAP4K4抗体

RNF59 环指蛋白59抗体

phospho-MAP4K4(Ser629) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶MAP4K4抗体

MVK 甲羟戊酸激酶抗体

MVD 甲羟戊酸脱羧酶抗体

ME1 胞浆苹果酸酶1抗体

MHC class I 组织相容性复合体蛋白1抗体

MFAP3L 208F大鼠成纤维细胞细胞培养操作规程：一．培养基及培养冻存条件准备：1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号优质胎牛血清，10%。2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。

温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。二．细胞处理：1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM，常温条件下离心5分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，吹打均匀后，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。