ROS1728 大鼠成骨细胞

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英文名称：

Osteoblasts of ROS1728 rats

编号BH-C3002

培养操作步骤 ：

1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；

2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；

3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；

4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；

5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。

实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；

2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造，并经过铬酸洗液处理；

3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；

4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；

5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

细胞培养的优点：

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

小鼠游离三碘甲状腺原氨酸(Free-T3)ELISA试剂盒 ，英文名： Free-T3 ELISA Kit

小鼠游离甲状腺素(FT4)ELISA试剂盒 ，英文名： FT4 ELISA Kit

小鼠游离睾酮(F-TESTO)ELISA试剂盒 ，英文名： F-TESTO ELISA Kit

小鼠幽门螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA试剂盒 ，英文名： Hp-IgG ELISA Kit

小鼠印度刺猬因子(IHH)ELISA试剂盒 ，英文名： IHH ELISA Kit

小鼠吲哚胺2,3-双加氧酶1(IDO1)ELISA试剂盒 ，英文名： IDO1 ELISA Kit

小鼠音猬因子N端(Shh-N)ELISA试剂盒 ，英文名： Shh-N ELISA Kit

小鼠抑制素B(INH-B)ELISA试剂盒 ，英文名： INH-B ELISA Kit

小鼠抑制素A(INH-A)ELISA试剂盒 ，英文名： INH-A ELISA Kit

小鼠抑瘤素M(OSM)ELISA试剂盒 ，英文名： OSM ELISA Kit

小鼠乙型肝炎核心抗体(HBcAb)ELISA试剂盒 ，英文名： HBcAb ELISA Kit

小鼠乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA试剂盒 ，英文名： HBsAg ELISA Kit

小鼠乙型肝炎表面抗体(HBsAb)ELISA试剂盒 ，英文名： HBsAb ELISA KitAPM2 脂肪特定转录因子2抗体 停乳链球菌APOL3 载脂蛋白L3抗体 猪霍乱沙门氏菌猪霍乱亚种ARMC3 (Cancer/testis antigen 81) 肿瘤/睾丸抗原81抗体 痤疮丙酸杆菌ATXN7L2 共济失调蛋白7样2抗体 金针菇ARS2 砷酸盐耐药蛋白ARS2抗体 立枯多核菌ARSA 芳香基硫酸酯酶1抗体 普雷恩毛霉ASNA1 砷酸盐转运三磷酸腺苷酶抗体 雅致放射毛霉＝葡匐放射毛霉ATE1 精氨酸tRNA的蛋白转移酶1抗体 短双歧杆菌ATXN7L1 共济失调蛋白7样1抗体 婴儿双歧杆菌AUTS2 孤独症易感基因2蛋白抗体（自闭症相关蛋白1） 普通变形杆菌ROS1728 大鼠成骨细胞ATX2 脊髓小脑共济失调2型蛋白抗体 热带灵芝ARSH 芳香基硫酸酯酶H抗体 南方树舌ACF1 溴区结构域相邻锌指蛋白1A抗体 炭球菌Apo-1 载脂蛋白1抗体 假芝Amisyn 突触融合结合蛋白6抗体 木层孔菌Arginase 1 精氨酸酶1抗体 皂味口磨细胞培养操作规程：一．培养基及培养冻存条件准备：1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号优质胎牛血清，10%。2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。

温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。二．细胞处理：1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM，常温条件下离心5分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，吹打均匀后，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。