普利莱 CCK-8细胞增殖毒性检测试剂盒 货号: E1008-1000

普利莱 CCK-8细胞增殖毒性检测试剂盒 货号: E

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ECCK-8细胞增殖毒性检测试剂盒1000次880ECCK-8细胞增殖毒性检测试剂盒3000次1880

特点：

1. 简单快捷、即开即用，可进行大规模样品检测。描述：Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂盒基于WST-8试剂，可对细胞增殖和细胞毒性进行快速高度灵敏的检测。与传统的MTT或其他类似的方法相比，本试剂盒生成的 Formazan 是水溶性的，而且更加稳定，其检测的线性范围更宽、灵敏度也更高。

2. 与其他方法相比，检测线性范围更宽，灵敏度更高。

3. 对细胞无明显毒性，可在不同时间进行多次测定，便于寻找最佳测定时间。

规格：200次 500次

储存：CCK-8试剂：2ml, 5ml，−20ºC 避光保存2年，4ºC 避光保存1年，反复冻融可能会增加背景值

操作步骤：

1. 使用与酶标仪相匹配的96孔培养板。通常进行细胞增殖实验时，每孔加100µl 2000个细胞，而测定细胞毒性时，每孔加100µl 5000个细胞，应根据所用的细胞类型、增殖速度进行调整。注意设置2-3个重复孔，分别为接受处理的细胞组，未处理的细胞对照组和无细胞培养基的对照组。37ºC培养细胞24-48小时，然后给予特定的药物或物理化学因素刺激。

2. 处理结束后，向每孔每100 µl培养基中加入10µl CCK-8试剂（注意在加入的过程中不要产生气泡，否则会影响OD值的读取），37 ºC培养箱内孵育1-4小时，培养时间的长短依据细胞种类、数量、活力等情况而定。初次实验者，可以选择几个不同的培养时间点如1h, 2h, 4h用酶标仪进行检测，以便选择出适宜的吸光度范围进行实验。

3. 在450nm测定OD吸光度并进行计算。如无450nm滤光片可用430-490nm范围内的滤光片。注意：若样品为浑浊的细胞悬液时，可以选用大于600nm的波长，如650nm作为参比波长进行双波长测定。

4. 结果判断：细胞增殖或毒性＝100％x (OD实验－OD本底) / (OD对照－OD本底)。

其中，OD实验是接受处理细胞组的OD值，OD对照是未处理细胞对照组的OD值，OD本底是无细胞培养基的对照组OD值。处理后细胞增殖或毒性变化表示为未处理对照的百分数。

说明：

1. 在进行培养或检测反应时，为避免培养基蒸发体积减少，可用封口膜部分封闭培养板。

2. 为减少由于CCK-8试剂在枪头上或孔壁上的残留所带来的误差，可以在加样前用培养基稀释CCK-8试剂混匀后再进行加样。

3. 本试剂盒的检测依赖于脱氢酶的催化反应，因此当检测体系中有还原性物质如葡萄糖、维生素C等存在时，会干扰测定。

4. 可在非96孔板进行CCK-8测定，但需要成比例加大反应体系。反应后用比色杯测定OD。

5. 用酶标仪检测之前，要确保每个孔内没有气泡，否则会影响测定。

6. 加入CCK-8试剂后，培养时间要根据不同的细胞种类、数量和细胞状态来确定。通常情况下，相同的培养时间，悬浮细胞和贴壁细胞相比，吸光度较低，可以延长培养时间或者增加细胞数量。此外，白细胞可能也需要较长的培养时间。

7. 培养基中含有酚红时，可以通过扣除培养基背景本底的吸光度去除酚红的影响，而不会对检测产生影响。

参考文献：

Maaria Iknoen, Pinchas Cohen et al. PNAS, 2003, 100:

Sachiko Sakon, Hiroyasu Nakano et al. The EMBO Journal, 2003, 22:

Akihide Takeuchi, Ken-ichi Isobe et al. Nature Genetics, 2003, 33: 172-176

Mohammed A. S. Khan, Earl R. Stadtman et al. PNAS, 2004, 101:

普利莱APPLYGEN常用抗体列表： 等等~~